تولید بز تراریخته حامل ژن بیان کننده فاکتورix انعقادی خون انسان با قابلیت ترشح در شیر به وسیله تکنیک انتقال هسته
Authors
abstract
تعداد بی شماری از پروتئین های نوترکیب وجود دارند که در شیر بیان می شوند. در این راستا می توان ژن مورد نظر را به منظور بیان در شیر یک حیوان مزرعه ای تحت کنترل عناصر تنظیمی قرار داد. انتقال هسته با استفاده از سلولهای ترانسفکت شده، ابزار کارآیی برای تولید حیوانات تراریخته است. در این مطالعه به منظور تولید بز تراریخته با توانایی ترشح فاکتور ix انعقادی انسانی نوترکیب (rhcfix) در شیر، سازه ژنی(pbc1-hfix) با قرارگیری cdna ژن مذکور بعد از پروموتور بتا- کازئین ساخته شد. سپس سلولهای فیبروبلاست جنینی بز توسط pbc1-hfix ترانسفکت شدند. سلولهای فیبروبلاست از جنینهای 35 تا 40 روزه بز تهیه گردید. سپس کلونهای مثبت (سلولهای فیبروبلاست حاوی سازه ژنی) انتخاب شده و توسط pcr تأیید شدند. به سلولهای فیبروبلاست جنینی ترانسفکت شده اجازه داده شد که پس از رسیدن به مرحله تراکم سلولی، به مدت 72 ساعت در همان محیط dmem حاوی 15 در صد سرم کشت شده تا در مرحله g0/g1 سیکل سلولی هم زمان شوند. تخمکهای نابالغ از تخمدان های کشتارگاهی به دست آمدند و قبل از بی هسته سازی و انتقال هسته بالغ شدند. تخمکهای بازسازی شده با سلولهای دهنده، فیوژشده و فعال سازی آنها با استفاده از یونومایسین و 6dmap انجام شد. جنینهای بازسازی شده به پذیرنده های هم زمان شده منتقل شدند. 64 جنین حاصل از سلولهای فیبروبلاست جنینی ترانسفکت شده به 12پذیرنده انتقال یافتند. در دو مورد از پذیرنده ها (16.6 درصد) بارداری در روز 42 توسط سونوگرافی تأیید شد. یکی از بارداریها منجر به تولد دو بزغاله سالم گردید. حضور ژن فاکتور ix انعقادی انسانی در بزغاله ها با استفاده از واکنش pcr وsequencing تأیید گردید. این نتایج نشان می دهد که سلولهای فیبروبلاست جنینی بز حاوی ژن فاکتور ix می توانند تکوین طبیعی جنین را پس از انتقال هسته تا مرحله ترم پیش برند. این اولین تولد زنده حیوان تراریخته در ایران است.
similar resources
طراحی و ساخت حامل لنتی ویروسی بیان کننده miRNA-499a و انتقال آن به سلول های بنیادی مزانشیمی انسان
Background and purpose: Lentiviral vectors (LVs) are suitable candidates for gene delivery to cells with stable and high-level of transgene expression in target cells. MicroRNAs (miRNAs, miRs) are non-protein coding, short (~22 nucleotides) and single-stranded RNAs that act as post-transcriptional regulators of gene expression, and are involved in various cellular processes, including prolifera...
full textبهینه سازی انتقال ژن به جو و تولید گیاهان تراریخته بارور با استفاده از آگروباکتریوم
در سالهای اخیر انتقال ژن به غلات به ابزار مهمی برای بهبود صفات زراعی گیاهان تبدیل شده است. جو یکی از با اهمیت ترین غلات دانه ای است که اصلاح آن برای افزایش تحمل به تنشهای زیستی و غیرزیستی از طریق انتقال ژن همانند سایر گیاهان زراعی از اهمیت زیادی برخوردار است. بهینه سازی عوامل مختلف موثر در تراریزش و باززایی گیاهان تراریخته اولین قدم در برنامه های انتقال ژن به گیاهان محسوب میشود. در این پ...
full textبررسی کارایی انتقال ژن از طریق اسپرم (smgt) در تولید آزمایشگاهی رویان های تراریخته بز
بر اساس علاقه فزاینده موجود در استفاده از فناوری انتقال ژن بواسطه اسپرم (smgt) به عنوان یک روش ساده و موثر در تولید حیوانات تراریخته، در تحقیق حاضر امکان استفاده از این فناوری در تولید رویان های تراریخته بز برای اولین بار در جهان مورد بررسی قرار گرفته است. اسپرم بز با پنج غلظت مختلف (0 تا 500 نانوگرم) از پلاسمید pcdna/his/lac-z ترانسفکت گردید و برای لقاح آزمایشگاهی (ivf) و یا تزریق درون سیتوپلا...
تولید اسید لینولئیک کانژوگه به وسیله اشریشیا کلی تراریخته
Background and purpose: Due to the beneficial physiological effects of conjugated linoleic acid (ÇLÂ), there has been a growing tendency to produce it as a functional lipid in recent years. Different ÇLÂ isomers have different physiological effects hence, production of certain ÇLÂ isomers with high purity is of great importance. ÇLÂ can be produced through both chemical and enzymatic methods ...
full textتولید انسولین به وسیله سلولهای بنیادی انسان
بیماری دیابت شایع‌ترین بیماری غدد درون‌ریز است. نیاز مادام‌العمر به پایش مکرر قند خون، تزریق انسولین و محدودیت در رژیم غذایی اعمال شده برای بیمار دیابتی بسیار نامطلوب و آزاردهنده است. از سوی دیگر، درمان عوارض دیابت، بار مالی بسیاری را بر جامعه تحمیل می‌نماید. در دهه اخیر، پیوند جزایر پانکراس به عنوان یک درمان بالقوه دیابت مورد بررسی گسترده‌ای قرار گرفته است. این موضوع همواره به سبب محدودیت در ت...
full textاثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین
Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...
full textMy Resources
Save resource for easier access later
Journal title:
مجله زیست شناسی ایرانPublisher: انجمن زیست شناسی ایران
ISSN 2008-9406
volume دوره 23
issue شماره 5 2010
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023